有人養過BEAS-2B這株cell line嗎
BEAS-2B type: human bronchial epitheliumBCRC Number:60344 ATCC Number:CRL-9609最近要養這株細胞 但發現一個問題若是依照BCRC或ATCC上的建議在一開始種細胞時
必須先coating一層包含fibronectin、bovine collagen type I及bovine serum albumin的LHC-9 medium。
但是我自己查了一些文獻發現有些paper似乎沒有precoated這層溶液而就只有用LHC-9 medium來養。
因此想請教若是有養過這株細胞的人可以給一些看法跟意見或是做過細胞培養的各位
能給一些建議。
若是我不先precoated這層溶液
有辦法養BEAS-2B嗎?感謝~
我也沒養過這一株。
但是
看你給的這個配方
LHC-9 medium算是coting buffer裡用的緩衝液
BSA等於只是一個蛋白質提供者
fibronectin和bovine collagen type I則是幫助cell adhesion的輔助物。
而這株是epithelium cell
原則上就比較容易脫落
所以加上這一層coating buffer的作用就是為了讓epithilium cell能很好的吸附在flask上。
由於養的細胞千奇百怪
有的需要吸附
有的不需要吸附
因此市面上賣的culture flask就不盡相同。
有的會在flask的底面coating一層幫助吸附的東西
有的不會。
因此有precoating的那些flask
可能底面沒有coating或coating的是不完全適合的東西;而那些沒有precoating的則是因為flask底部已經先coating好了。
一般而言
寫養細胞的方法時
也會寫用的flask是哪家的哪一種
會不會去查一下該廠牌的catalogue會比較清楚?當然
還有一個可能
就像我以前老闆的實驗室
我們都是將harvest後的flask reuse(當然僅限於同一種細胞)
因此
在寫paper的時候
會不自覺的漏掉這一段
因為有時有coating(用新的)有時沒coating(用reused)。
或者
還有一個可能
那些paper的記述不專是為了敘述這個細胞怎麼養
所以作者在寫方法時就不會寫的這麼細或是認為這是常識所以不多寫。
這些情況都有可能發生
因此可能你需要判斷一下再決定要不要用。
我覺得如果fibronectin和bovine collagen type I如果不難獲得的話
還是precoating一下比較安全
畢竟你之前沒養過
再怎麼小心也不為過吧。
參考資料
Myself
我本身沒養過這株細胞不過我養的cell line也都很奇怪但是原則上是如果你能照標準的方式養就照標準方式養如果有替代medium也可以試試看有時候養這個要看你的目的如果你是短期實驗或是你養起來不影響你的實驗目的那你要麼養都沒關係但是最標準的方式就是照他原始方法養細胞的特性以及穩定性比較不容易改變
既然 有些 paper 也沒用Coating 來培養表示該細胞 也可以不coating 就可以養其實 Coating 只是讓細胞更容易緊貼在培養瓶生長有些比較不
留言列表